Prestations

Création de lignée de cellules iPS

INGESTEM dispose du plus large éventail de cellules iPSC produites en France et en Europe. Plus de 200 lignées iPSC humaines normales ou pathologiques sont disponibles et distribuées pour les projets de recherche (www.hescreg.eu).

INGESTEM met à la disposition de la communauté académique et industrielle la technologie de création de lignées de cellules iPS à façon, à partir de cellules primaires aux génotypes d’intérêt.

Trois prestations sont disponibles:

  • La production d’iPSC à façon à usage exclusif (service à la demande)
  • La production d’iPSC « iPSC outil recherche » dans le cadre d’un travail collaboratif (cf. onglet banque)
  • Entretien et maintien en culture de vos lignées iPSC (Abonnement annuel)

Étapes clés de la prestation

Préparation des cellules somatiques

  • Analyse et préparation administrative de la demande
  • Sélection des donneurs, recueil des données biologiques et génétiques
  • Tests sanitaires sur cellules
  • Conservation d’une banque de cellules primaires

Reprogrammation cellaulaire

  • Mise en culture des cellules somatiques
  • Reprogrammation par méthodes non-intégratives

Sélection, caractérisation et amplification des clones d’iPSC

  • Sélection de 4 clones par morphologie et marqueurs de pluripotence.
  • Tests d’intégrité génomique et de pluripotence in vivo
  • Amplification d’une banque primaire de la lignée iPS (clones et lignée polyclonale)
  • Test de viabilité aux cycles de congélation / décongélation.

En amont du projet, un contrat de réalisation est rédigé, et d’un MTA, accompagné du consentement éclairé des patients sont les échantillons sont anonymisés.

De nombreux types de cellules primaires peuvent être reprogrammées en iPSC : cellules mononuclées du sang, fibroblastes, cellules mésenchymateuses, cellules du sang de cordon, cellules épithéliales, etc.


Le statut des cellules primaires est vérifié (mycoplasmes, HIV, CMV, HCV, HBV) ainsi que leur profil génétique (caryotype, CNV, SNP).
Les cellules sont reprogrammées exclusivement par des méthodes non-intégratives
: virus de Sendaï, mRNA ou épisomes.

 

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